O LIAC Central Sorol\u00f3gica vem trabalhando oficialmente com Biologia Molecular (NAT) para triagem de doadores desde de 2007. Inicialmente utiliz\u00e1vamos o sistema \u201cIN HOUSE\u201d desenvolvido no pr\u00f3prio LIAC, este tinha a capacidade de detectar os V\u00edrus da Imunodefici\u00eancia Humana (HIV) e os V\u00edrus da Hepatite C (HCV). Ap\u00f3s 2010 come\u00e7amos a utilizar o sistema Cobas S201- Roche, sistema automatizado capaz de detectar al\u00e9m do HIV 1-2, o HCV e o V\u00edrus da Hepatite B (HBV).<\/p>\n
O principal objetivo do NAT \u00e9 reduzir o tempo de detec\u00e7\u00e3o dos v\u00edrus e com isso diminuir o risco residual m\u00ednimo de um sangue doado capaz de conter um pat\u00f3geno infectante. Quando comparamos o risco residual m\u00ednimo no Brasil com pa\u00edses desenvolvidos como EUA, Alemanha, Jap\u00e3o e Austr\u00e1lia, observamos que ainda apresentamos altos \u00edndices em rela\u00e7\u00e3o a estes pa\u00edses. (Petry e Kupek, 2014)
\nO sistema de Triagem Molecular do LIAC, j\u00e1 foi capaz de detectar 8 casos de janela imunol\u00f3gica ou seja, testes com triagem sorol\u00f3gica negativa mas com NAT positivo. A seguir, descrevemos brevemente estes casos ilustrando a import\u00e2ncia da utiliza\u00e7\u00e3o deste sistema na triagem de doadores.<\/p>\n
Detec\u00e7\u00e3o de HIV
\nO HIV \u00e9 uma part\u00edcula esf\u00e9rica, que mede de 100 a 120 nm de di\u00e2metro, pertencente ao g\u00eanero Lentivirinae e fam\u00edlia Retroviridae, apresentando em seu n\u00facleo duas c\u00f3pias de RNA de cadeia simples, encapsuladas por uma camada proteica ou n\u00facleo-caps\u00eddeo, caps\u00eddeo e um envelope externo composto por uma bicamada fosfolip\u00eddica. O genoma do HIV inclui tr\u00eas principais genes que codificam as prote\u00ednas estruturais e enzimas virais: gag, env e pol. A nomenclatura das prote\u00ednas virais utiliza a abrevia\u00e7\u00e3o \u201cgp\u201d para glicoprote\u00edna ou \u201cp\u201d para prote\u00edna, seguida de um n\u00famero que indica o peso molecular em kilodaltons (kd). (Miller et al., 2010)<\/p>\n
Fig 1- Estrutura do HIV<\/p>\n
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Em m\u00e9dia, os testes sorol\u00f3gicos de \u00faltima gera\u00e7\u00e3o conseguem detectar a presen\u00e7a do HIV a partir de 22 dias ap\u00f3s a infec\u00e7\u00e3o, quando utilizamos o NAT este per\u00edodo diminui para aproximadamente 11 dias.
\nFig 2. Marcadores da infec\u00e7\u00e3o pelo HIV na corrente sangu\u00ednea de acordo com o per\u00edodo que surgem ap\u00f3s a infec\u00e7\u00e3o, seu desaparecimento ou manuten\u00e7\u00e3o ao longo do tempo.<\/p>\n
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Detec\u00e7\u00e3o de HCV
\nHCV pertence a ordem Nidovirales, fam\u00edlia Flaviriridae, do g\u00eanero Hepacivirus. O genoma \u00e9 constitu\u00eddo de uma mol\u00e9cula de RNA fita simples com aproximadamente 9500 nucleot\u00eddeos. As part\u00edculas virais possuem cerca de 50mm de di\u00e2metro e consistem em um envelope derivado da membrana do hospedeiro que cont\u00e9m as glicoprote\u00ednas E1 e E2 envolvendo o nucleocaps\u00eddeo. (Sachdev e Marwaha, 2014)
\nFig. 2 Estrutura do HCV<\/p>\n
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Utilizando ensaios sorol\u00f3gicos de terceira gera\u00e7\u00e3o, a m\u00e9dia da janela imunol\u00f3gica para HCV fica em torno de 66 dias p\u00f3s infec\u00e7\u00e3o, quando utiliza-se o NAT a redu\u00e7\u00e3o da janela imunol\u00f3gica \u00e9 dr\u00e1stica, podendo chegar a 8 dias. (Marwaha e Sachdeve, 2014)
\nA figura 3 representa a presen\u00e7a dos marcadores durante a infec\u00e7\u00e3o pelo HCV.<\/p>\n
Fig 3: Marcadores durante a infec\u00e7\u00e3o pelo HCV<\/p>\n
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Detec\u00e7\u00e3o de HBV
\nO HBV pertence \u00e0 fam\u00edlia Hepadnaviridae , do g\u00eanero Orthohepadnavirus. O HBV possui um mecanismo \u00fanico entre os v\u00edrus que infectam o homem que permite a produ\u00e7\u00e3o de diferentes tipos de part\u00edculas virais. A concentra\u00e7\u00e3o de part\u00edculas virais completas no soro de pessoas infectadas pode ultrapassar a concentra\u00e7\u00e3o de 109\/mL.
\nAs part\u00edculas virais s\u00e3o esf\u00e9ricas, com di\u00e2metro de aproximadamente 42mm apresentando um envelope lipoproteico, composto pelas prote\u00ednas virais S (small) M (middle) e L (large), as quais constituem o HBsAg e lip\u00eddios oriundos da membrana celular. O nucleocaps\u00eddeo possui simetria icosa\u00e9drica e \u00e9 constitu\u00eddo pela prote\u00edna do core (HBcAg) e pelo genoma viral.<\/p>\n
Fig 4: Estrutura do HBV<\/p>\n
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Dada a complexidade do diagn\u00f3stico do HBV, diversos marcadores podem ser utilizados para sua detec\u00e7\u00e3o. O intuito destes, \u00e9 detectar as diferentes fases do est\u00e1gio de infec\u00e7\u00e3o (Fig 5). O LIAC trabalha com os 2 marcadores sorol\u00f3gicos obrigat\u00f3rios para triagem de doadores, mais o NAT para HBV. Entre os dois marcadores sorol\u00f3gicos est\u00e3o o ensaio capaz de detectar o ant\u00edgeno de superf\u00edcie HBs, o qual \u00e9 considerado o marcador sorol\u00f3gico que indica est\u00e1gio de replica\u00e7\u00e3o viral e o Anti-HBc que indica que j\u00e1 houve contato com o v\u00edrus. (Kiely et al, 2014)
\nA utiliza\u00e7\u00e3o do NAT para detec\u00e7\u00e3o do HBV al\u00e9m de ser capaz de reduzir a janela imunol\u00f3gica de 60 dias para 10 dias aproximadamente, tamb\u00e9m \u00e9 importante na detec\u00e7\u00e3o da Hepatite B oculta, que se caracteriza por uma forma de infec\u00e7\u00e3o cr\u00f4nica onde o HBsAg n\u00e3o \u00e9 detect\u00e1vel e os n\u00edveis de HBV DNA s\u00e3o baixos. (Kiely et al, 2014)<\/p>\n
Fig 5: Marcadores durante a infec\u00e7\u00e3o pelo HCV<\/p>\n
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Resumo dos Casos<\/p>\n
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Refer\u00eancias Bibliogr\u00e1ficas<\/p>\n
KUPEK E., PETRY A. Changes in the prevalence, incidence and residual risk for HIV and hepatitits C virus in Southern Brazilian blood donors since the implementeation of NAT screening. Worl Journol of Gastroenterology (2014)
\nManual T\u00e9cnico para HIV, 2013. Minist\u00e9rio da Sa\u00fade.
\nMILLER, L. E. Laboratory Diagnosis of HIV Infection. In: STEVENS, C.D. Clinical immunology and serology: a laboratory perspective. Philadelphia: F.A. Davis Company, 2010. 476 p. 3. ed.
\nMARWAHA N., SACHDEV S. Current Testing strategies for hepatitis C virus infection in blood donors and the way forward (2014)- 20(11): 2948-2954 .
\nHOWARD C. R. The Biology of Hepadnaviruses. (1986) Journal of General Virology<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"